上海龙田生物科技有限公司

生物资讯

文章被拒?可能是忽略了这几件事

从文章被接收到见刊,这中间还有一些事宜需要作者处理,今天小编来和大家说说文章接收后

关于细胞实验的,作者还需要提供哪些资料或报告?

细胞系认证的问题存在几十年了,是否还记得,由于用错细胞系,英国科瑞克研究所Julian Downward 教授撤销了Natrue 论文?

是否还记得,河北科技大学韩春雨开创的NgAgo基因编辑技术因为细胞污染竟然重复不出来了?

那杂志的Editor究竟都要求作者提供哪些细胞培养相关的资料或报告呢?

1.对比ICLAC交叉污染或鉴定错误的细胞株数据库

使用的细胞系是否在ICLAC的交叉污染/错误鉴定细胞系数据库列表中?如果是,需要列出在哪一页或哪一部分中。

对比查阅请戳交叉污染(错误鉴定)细胞系数据库

2.细胞是在何时何地获得的?

3.细胞系是否经过测试和验证?

4.细胞最后一次测试的方式和时间?

5.测试细胞的方法 (STR, 核型分析或同工酶分析)

STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)分析已被ICLAC、ATCC等权威机构作为细胞鉴定的金标准,同时STR也是法医与亲子鉴定的金标准。STR基因位点由长度为3~7个碱基对的短串连重复序列组成,这些重复序列广泛存在于人类基因组中,可作为高度多态性标记,被称为细胞的DNA指纹(如目前我们亲子鉴定即采用该技术),其可通过PCR(聚合酶链式反应)扩增和测序来检测。STR 基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分,在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法,即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库(ATCC, DSMZ)比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。

Dr.Cell 细胞STR鉴定方法完全符合美国国家标准局NIST颁布的细胞鉴定标准-ANSI/ATCC ASN-0002-20011, 并且在CMA认证与司法鉴定许可的实验室进行。

染色体核型分析技术是当前染色体疾病临床诊断的主要方法,同时也是临床遗传学诊断的金标准。一般情况下各种生物的染色体数目和形态都是恒定的,染色体是物种的标志,同一物种染色体数目相同。不同的物种染色体的数目是不相同的,人染色体是 46 条,大猩猩染色体是 48 条,鸡染色体是 70 条。染色体核型分析可鉴定分析细胞物种来源。

同工酶(isoenzyme)是指蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同,但是催化的化学反应相同的一组酶。这类酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织、甚至是不同的细胞中。通过同工酶谱的分析,可以研究物种进化、遗传变异、杂交育种、个体发育差异等多种信息。法医学中也可用多种同工酶谱的分析来鉴定亲子关系。

6.支原体污染检测情况

最好能提供支原体污染检测报告。目前支原体污染检测方法主要有:

1)培养法:将待检测样品先接种到支原体液体培养基中大量繁殖,然后再转接种到支原体固体培养基中,培养一段时间后(大约一个月),如果固体培养中出现典型的支原体菌落,则说明待测样品有支原体污染。耗时较长,但是最准确的检测方法。

2)荧光染色法:主要是能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst33342或Hoechst33258,可使支原体内DNA着色,染色后可用荧光显微镜观察。

3)酶活法:支原体溶解时释放出来的酶与底物发生催化反应,通过生物发光化学反应检测,并通过分光光度计进行读数,从而达到检测支原体的目的。

4)PCR法:利用对支原体基因组中保守的编码域序列进行PCR检测的方法来进行支原体检测。该方法操作快速、准确性高,市面上有多款相关产品可参考(BI:EZ-PCR支原体检测试剂盒)