产品介绍
以特定酶自组织块分离出原代间充质干细胞是常见的细胞培养技术。ACF高效原代间充质干细胞分离液利用数种重组表达的消化酶制备而成,无动物源成分。ACF高效原代间充质干细胞分离液针对组织的细胞外基质而设计, 不含胰酶,不会伤害细胞。可以有效地消化细胞外基质,进而从组织块 (脐带、脂肪、胎盘) 分离出大量的原代间充质干细胞,作为后续细胞增殖使用。
预期用途
使用AF高效原代干细胞分离液由组织块(脐带、脂肪、胎盘)分离出间充质干细胞,提供后续培养增殖。主要组成成分
由数种重组表达、无物动源的酵素和培养基组合而成。
使用方法(以脐带组织为例)
● 将脐带用DPBS (BI, Cat#02-023-1A) 漂洗干净,剪成1-50px大小,剔除血管。
● 将组织块剪成3-5mm3,移入50ml离心管,再加入适量的分离液。
* 一条长度10公分的脐带建议加入10ml的分离液;或者组织块 : 分离液(vol)= 1:1。
** 视情况而定,可自行在分离液中添加1%青链双抗(BI, Cat# 03-031-1B) 。
● 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱,过夜反应(16小时)
* 若总反应体积较大,也可持续旋转混合。
● 加入和分离液等体积的0.05%EDTA(BI, Cat# 03-015-1B)终止反应后,1500 xg离心5分钟,去除上清。
* 溶液比较浓稠,小心不要影响下层的细胞; 建议留下5ml左右的溶液。
** 若是脂肪组织,没有粘稠的情形,以常规的200-300 xg离心即可。
*** 没有EDTA, 可使用无钙镁DPBS取代;此时建议后面步骤6多重复2-3次,以确实去除酵素。
● 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,500 xg离心5分钟,去除上清。
● 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。
● 用适量的培养基重悬细胞后,即可按常规细胞培养方法接种P0代细胞培养。
* 消化后的原代细胞,建议培养时接种密度提高到10,000/cm2以上;传代后即可按常规的接种密度培养 。
产品效果
Day 6_P0
Day 12_P1
Day 22_P4
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